一、基本要求 

掌握：本章要求掌握分光光度法的特點、基本原理、測定方法及計算方法；分子吸收光譜與電子躍遷類型，物質(zhì)對光的選擇吸收與吸收光譜曲線，摩爾吸收系數(shù)與吸收系數(shù)，吸光度與透光度，偏離朗伯-比爾定律的原因；掌握顯色反應條件及光度測量條件的選擇；掌握紫外—可見分光光度計的主要部件，各部件的作用及儀器原理，主要類型及特點；掌握差示分光光度法的原理、特點。 

理解：物質(zhì)分子結(jié)構(gòu)與紫外吸收光譜的關(guān)系，吸收波長位移與分子結(jié)構(gòu)變化的關(guān)系；紫外—可見分光光度定量分析影響結(jié)果準確度的各種因素。 

了解：了解紫外—可見分光光度法測定靈敏度和選擇性的途徑；雙波長分光光度法等其它分光光度法定量測定的方法；紫外—可見分光光度法在有機化合物的結(jié)構(gòu)解析方面的作用及在其他方面的應用。 

二、 基本概念與重點內(nèi)容 

A概述 

1．紫外—可見分光光度法的特點 

靈敏度與準確度較高；選擇性較好；設備簡單、操作簡便。 

2．分光光度法的發(fā)展過程 

目視比色法 光電比色法 分光光度法 

3． 分子的紫外—可見吸收光譜 

分子的紫外—可見吸收光譜是基于物質(zhì)分子吸收紫外輻射或可見光，其外層電子躍遷而成，又稱分子的電子躍遷光譜。紫外—可見分光光度法是基于物質(zhì)分子的紫外—可見吸收光譜而建立的一種定性、定量分析方法。 

4． 光的基本性質(zhì) 

5．物質(zhì)對光的吸收及吸收光譜 

6．紫外—可見吸收光譜與電子躍遷類型 

7．生色團與助色團 

B 光的吸收定律 

1．光吸收的基本定律（朗伯-比爾定律） 

2．吸光度與透光率、百分透光率之間的關(guān)系 

3．工作曲線的繪制與應用 

4．吸光系數(shù)、摩爾吸光系數(shù)和桑德爾靈敏度 

5． 偏離朗伯-比爾定律的因素 

C紫外-可見分光光度計 

1． 分光光度計的主要部件 

2． 在紫外和可見光區(qū)進行測量時，分別選擇何種光源 

3． 單色器的主要元件 

光柵；棱鏡 

4． 分光光度計中的檢測器類型 

早期：光電池；光電管；光電倍增管。 

5．紫外-可見分光光度計的類型及特點 

D顯色測定試樣的制備和光度測定條件的選擇 
、 
1．顯色反應及其影響因素 

2．測定讀數(shù)誤差和測定條件的選擇 

5．入射波長的選擇 

E 分光光度定量測定方法與其他應用 

1．單組分的測定 

通常采用 A-C 標準曲線法定量測定。 

2.多組分的同時測定 

3．紫外可見吸收光譜在有機化合物結(jié)構(gòu)解析中的作用 

了解共軛程度、空間效應、氫鍵等；可對飽和與不飽和化合物、異構(gòu)體及構(gòu)象進行判別。在有機化合物結(jié)構(gòu)解析中，紫外可見吸收光譜沒有紅外吸收光譜提供的結(jié)構(gòu)信息多。 

4．紫外—可見吸收光譜中有機物發(fā)色體系信息分析的一般規(guī)律